Noul Thermo Scientific Krios G4 Cryo-TEM este cel mai compact microscop de transmisie din categoria sa, ce permite investigarea facila, rapida si reproductibila a probelor biologice conservate criogenic la nivel molecular. Prin reproiectarea sistematica a structurii mecanice si a sistemului de panouri izolatoare, inaltimea microscopului a coborat sub 3 m, astfel ca instrumentul poate fi instalat in spatii cu tavan normal, nefiind necesara reamenajarea costisitoare a laboratorului. Faptul ca peste 95% din imaginile SPA cu rezolutia <4 Å publicate in jurnale stiintifice au fost obtinute cu Cryo-TEM-uri fabricate de Thermo Fisher, demonstreaza operativitatea si caracteristicile tehnice exceptionale puse la dispozitia cercetatorilor. Conectivitatea complet integrata asigura un flux de lucru sigur si fiabil, incepand cu prepararea probei si pana la achizitionarea imaginii si prelucrarea datelor.
Krios G4 Cryo-TEM este o platforma extrem de stabila cu sursa electronica de 300 kV si sistem Autoloader de introducere a probelor (robot de manipulare a probelor criogenice), ceea ce-l recomanda pentru aplicatii automatizate, cum ar fi analiza pe o singura particula (SPA), tomografie electronica cu criogenare (Cryo-ET) si difractie micro-electronica (MicroED). Limita de detaliu de numai 0.12 nm si distorsiunile liniare mentinute sub 0.5%, recomanda acest Cryo-TEM pentru reconstructia 3D de rezolutie ultra-inalta a moleculelor din ce in ce mai mici. Productivitatea echipamentului poate fi imbunatatita prin adaugarea noului detector Falcon 4, proiectat pentru o viteza de achizitie ridicata, un raport semnal-zgomot mare si distributia pixelilor mare (de 14 µm). Acesta este complet integrat in solutiile software de Tomografie si Thermo Scientific EPU, care este inclus intr-o noua platforma de clasificare a datelor (DPM), ce organizeaza volume foarte mari de date prin comunicarea directa cu sistemul de procesare a imaginii.
A fost elaborat un sistem de diagnosticare integrat, care sa monitorizeze alinierile coloanei electro-optice si sa optimizeze caracteristicile de achizitie a datelor de inalta rezolutie. Datorita rutinelor software de aliniere automata a coloanei verticale, microscopul se afla mereu in cele mai bune conditii de lucru. Procedura de translatare fara aberatii a imaginii (AFIS) consta in cresterea de pana la 4 ori a vitezei de colectare a datelor prin comutarea repetata imagine-fascicul in locul deplasarii mecanice a suportului de proba. La randul sau, EPU Quality Monitor preproceseaza datele SPA in timpul procedurii efective de achizitionare, ceea ce permite unui operator experimentat sa evalueze si sa optimizeze in timp real calitatea informatiilor obtinute.
Pe langa stabilitatea mecanica si termica a echipamentului, suportul de proba mono-axa contribuie la calitatea vizualizarii si achizitionarii datelor SPA printr-o abatere laterala minima odata cu introducerea probei in coloana. Camera de incarcare a probelor a fost repozitionata la o inaltime accesibila, nemaifiind necesara urcarea pe scara pentru fixarea probelor pe suport, iar un ecran interactiv este plasat in vecinatate pentru monitorizarea si selectarea parametrilor esentiali de functionare. In timp ce Autoloader-ul este controlat de EPU, toate cele 12 grile ce pot fi incarcate simultan sunt examinate automat. Un experiment SPA obisnuit consta in examinarea generala a probei inghetate, urmata de achizitia ulterioara a volumului reprezentativ de date necesare reconstructiei 3D. Dupa evaluarea preliminara si marcarea tuturor ochiurilor grilelor, sunt identificate automat cele mai potrivite zone in functie de prezenta si/sau grosimea stratului de gheata, pentru investigarea ulerioara la nivel molecular de rezolutie ridicata.